细胞培养是一种在人工控制条件下,使细胞在体外生存并增殖的技术。它对于基础生物学研究、药物开发、再生医学和诊断等域至关重要。以下是一个基本的细胞培养步骤概述:
一、准备工作
* 清洁和消毒所有工作台面、工具和培养容器,通常使用70%酒精擦拭。
* 穿戴适当的实验室防护装备,如实验服、套和口罩。
二、培养基的制备
* 根据所需细胞类型,配制适宜的培养基,这通常包括基础培养基、血清、抗生素和其他生长因子。
* 从现有细胞培养中取出一部分细胞,通常使用胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞。
* 将含有细胞的培养瓶放入恒温箱中,维持适宜的温度、湿度和CO?浓度。
* 定期观察细胞生长情况,使用倒置显微镜检查细胞形态和密度。
五、细胞收获
* 当细胞达到适当的生长密度时,再次使用胰蛋白酶EDTA溶液消化细胞。
* 收集细胞悬液,并通过离心分离细胞。
六、细胞计数和种植
* 使用细胞计数板或自动细胞计数器计算细胞数量。
* 所有使用过的培养基、细胞悬液和其他废弃物都应按照生物危险废物处理规定进行处置。