如何控制猪ELISA试剂盒的加标回收率

猪ELISA试剂盒的加标回收率控制主要通过以下方法实现：

?1.加标方法选择

?方法一（前处理时加标）?：在样本前处理阶段加入标准液，适用于基质效应较小的样本。需对同一样本的高、中、低三个浓度回收率取平均值作为最终结果?。

?方法二（前处理后加标）?：样本前处理完成后加入标准液，可避免前处理步骤的干扰。需取3个不同样本，每个样本做平行样，低浓度取3个样本回收率的平均值，中、高浓度分别取对应浓度的回收率。

?2.加标量控制

加标体积需≤原样本体积的10%，避免基质效应影响。

加标浓度应覆盖预期检测范围，低浓度样本需避免前滞效应，高浓度样本需避免钩状效应?。

?3.实验操作规范

使用精准移液器（系统误差≤2%），遵循“一头一换"原则防止交叉污染?。

确保试剂温度平衡至室温（20-25℃），避免温度不均导致结果偏差。

?4.结果计算与验证

回收率公式：回收率 = (测定回收样本浓度均值 - 测定基础样本浓度均值) / 加入浓度 × 100%。

合格标准：平均回收率应在?80%-120%?之间，板内/板间变异系数（CV）分别<10%和<15%。

?注意事项?：基础样本需用不含待测物的基质液稀释，确保结果准确性。若回收率异常，需检查样本基质干扰或优化稀释比例。