人恙虫病(STA)ELISA试剂盒
规格:96T/48T
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ELISA(酶联免疫吸附试验)试剂盒是一种基于免疫学反应的试验技术,它将抗原和抗体的特反应与酶的催化作用相结合。ELISA 试剂盒主要
用于检测特定抗原或抗体在样本中的含量。下面是ELISA试剂盒的操作步骤:
操作步骤:
1.准备试剂:ELISA试剂盒中包含以下组分:已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)、酶标记的抗原或抗体(结合物)、酶的底物、阴性对
照品和阳性对照品(定性测定中)、参考标准品和控制血清(定量测定中)、结合物及标本的稀释液、洗涤液和酶反应终止液。
2.包被:用包被缓冲液将抗原或抗体稀释至适当浓度然后在每个聚苯板的反应孔中加入0.1ml,4°C过夜。
3.洗涤:弃去孔内溶液用洗涤缓冲液清洗反应孔,,重复3次每次3分钟。
4.加样:将待检样品和阴性对照品、阳性对照品按一定稀释度加入已包被的反应孔中,37°C孵育 1小时。
5.洗涤:再次清洗反应孔。
6.加酶标记物将酶标记的抗原或抗体加入反应孔中,37°C孵育1小时。
7.洗涤清洗反应孔。
8.加底物:每个反应孔中加入适量的酶底物,37°C孵育10-30分钟。
9.终止反应加入终止液终止酶促反应。
10.读数:用酶标仪检测各反应孔的吸光度值根据标准曲线计算待测样品的浓度。
通过上述步骤,可以实现对特定抗原或抗体的高灵敏度检测。
操作注意事项:
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染吸取终止液和底物A、B液时,避免使 用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感避免长时间暴露于光下。避免用手接触有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致以保证所有 反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
产品性能:
1.灵敏度:的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2.特不与其它细胞因子反应。
3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。